oxidase-negativo

**Princípio do teste:** A citocromo c oxidase (complexo IV da cadeia transportadora de elétrons) transfere elétrons do citocromo c para o O2. No laboratório, um aceptor artificial de elétrons (tetrametil-p-fenilenodiamina, ou dimetil-p-fenilenodiamina no reagente de Gordon-McLeod) é oxidado pela enzima e adquire cor azul-escura/roxa. Os organismos oxidase-positivos ficam roxos em cerca de 10 a 30 segundos. Os organismos oxidase-negativos não mudam de cor. Use alça de platina, plástico ou madeira, e não uma alça de níquel-cromo que contenha ferro, que pode dar falso-positivo.

**Organismos oxidase-negativos (alto rendimento):** - Enterobacterales (todas as fermentadoras e não fermentadoras de lactose): *E. coli*, *Klebsiella*, *Enterobacter*, *Citrobacter*, *Serratia*, *Salmonella*, *Shigella*, *Proteus*, *Yersinia*, *Morganella*, *Providencia* - *Acinetobacter baumannii* (não fermentador; isso a diferencia de *Pseudomonas*) - *Stenotrophomonas maltophilia* (variável ou fraca; geralmente relatada como negativa) - As espécies de *Haemophilus* são oxidase-positivas, portanto não as confunda. - A maioria dos gram-positivos não é testada, porque o teste é aplicado principalmente a gram-negativos. *Staphylococcus* e *Streptococcus* são comparados pela catalase.

**Organismos oxidase-positivos (mnemônico para contraste):** *Pseudomonas aeruginosa*, *Neisseria*, *Moraxella*, *Vibrio*, *Campylobacter*, *Helicobacter*, *Legionella*, *Aeromonas*, *Pasteurella*, *Haemophilus*, *Brucella* (variável), *Bordetella pertussis*.

**Significado clínico e diagnóstico:** - O teste da oxidase é uma primeira etapa rápida para dividir os bacilos gram-negativos em Enterobacterales (oxidase-negativas, fermentadoras de glicose) e organismos não fermentadores ou outros oxidase-positivos. - A maioria das Enterobacterales oxidase-negativas fermenta a glicose, reduz nitrato a nitrito e cresce em ágar MacConkey. As fermentadoras de lactose (*E. coli*, *Klebsiella*, *Enterobacter*) aparecem rosadas. As não fermentadoras de lactose (*Salmonella*, *Shigella*, *Proteus*, *Yersinia*) aparecem incolores. - Pseudomonas vs. Acinetobacter: ambos são organismos gram-negativos aeróbios não fermentadores associados a infecção hospitalar (pneumonia associada à ventilação mecânica, queimaduras, infecções de cateter). *Pseudomonas* é oxidase-positiva e *Acinetobacter* é oxidase-negativo. - Relevância clínica: as Enterobacterales oxidase-negativas causam ITU (*E. coli*, a causa mais comum), pneumonia e abscesso hepático (*Klebsiella*), gastroenterite e febre entérica (*Salmonella*), disenteria (*Shigella*) e cálculos de estruvita (*Proteus*). As Enterobacterales resistentes a carbapenêmicos (CRE) e as produtoras de ESBL são patógenos resistentes oxidase-negativos importantes.

**Pérolas para prova:** - Oxidase-negativa + fermentadora de lactose + rosada no MacConkey → *E. coli*, *Klebsiella*, *Enterobacter*. - Oxidase-negativa + não fermentadora de lactose + H2S positivo → *Salmonella* ou *Proteus*. Ambos produzem H2S. *Proteus* também é urease-positivo e forma enxame (swarming) no ágar. - Um bacilo gram-negativo não fermentador oxidase-negativo deve fazer você pensar em *Acinetobacter*. Se for oxidase-positivo, com pigmento azul-esverdeado e odor de uva, pense em *Pseudomonas aeruginosa*. - A atividade da oxidase está relacionada à cadeia transportadora de elétrons. Os organismos com citocromo c oxidase usam o O2 como aceptor final de elétrons na respiração.