fixação do complemento

**Princípio (ensaio em duas etapas):** 1. Etapa do teste: o soro do paciente (inativado pelo calor para destruir o complemento nativo) é misturado com um antígeno conhecido mais uma quantidade medida de complemento exógeno (geralmente de cobaia). Se o soro contiver anticorpo específico, formam-se complexos antígeno-anticorpo que ativam a via clássica (C1q se liga ao Fc de IgG ou IgM), consumindo (fixando) o complemento. 2. Etapa indicadora: adicionam-se hemácias de carneiro revestidas com anticorpo anti-hemácias de carneiro (hemolisina/amboceptor). - Complemento consumido (anticorpo presente): sem lise, as hemácias sedimentam formando um botão. Este é um teste POSITIVO. - Complemento ainda livre (sem anticorpo): as hemácias indicadoras sofrem lise, e a solução fica vermelha/clara. Este é um teste NEGATIVO. - Regra mnemônica: "No hemolysis = positive" [sem hemólise = positivo].

**Base sobre o complemento (alto rendimento):** - Via clássica: desencadeada por IgG (IgG1, IgG3) ou IgM complexadas ao antígeno. C1q, depois C1r/C1s, C4, C2, C3 convertase (C4b2a), depois C3b, depois C5 convertase (C4b2a3b). - Via alternativa: superfícies microbianas (hidrólise espontânea de C3). Via das lectinas: a lectina ligadora de manose se liga à manose microbiana. - Todas as vias convergem em C3 e, depois, no complexo de ataque à membrana (MAC) C5b-C9, que lisa as células. - Funções principais: C3b = opsonização; C3a, C4a, C5a = anafilatoxinas (C5a também é quimiotaxina de neutrófilos); C5b-9 = MAC. - A IgM é a fixadora de complemento mais eficiente; a IgG vem em seguida. IgA, IgD e IgE não fixam complemento pela via clássica (a IgA pode ativar as vias alternativa/das lectinas).

**Usos clínicos e associações:** - Diagnóstico sorológico de Coccidioides immitis (os títulos de fixação do complemento se correlacionam com doença disseminada; título crescente sugere disseminação), Histoplasma, Blastomyces, Rickettsia/Coxiella (febre Q), Chlamydia (p. ex., LGV, psitacose), Mycoplasma e alguns vírus (p. ex., VSR, influenza, arbovírus). - Reação de Wassermann para sífilis (histórica; hoje substituída por testes não treponêmicos como VDRL/RPR e testes treponêmicos como FTA-ABS). - Foi amplamente substituído por ELISA, PCR e imunofluorescência, pois o TFC é trabalhoso e menos sensível.

**Conceitos clínicos relacionados:** - Doenças por imunocomplexos (hipersensibilidade tipo III, p. ex., LES, glomerulonefrite pós-estreptocócica, doença do soro) fixam complemento in vivo e reduzem C3/C4 séricos e CH50 (complemento hemolítico total). - Consumo da via clássica: C4 baixo, C3 baixo (p. ex., LES, GN por imunocomplexos). Ativação da via alternativa: C3 baixo com C4 normal (p. ex., glomerulopatia C3, GN pós-infecciosa). - Deficiências: inibidor da C1 esterase (angioedema hereditário; C4 baixo; sem urticária; inibidores da ECA contraindicados); C3 (infecções sinopulmonares piogênicas recorrentes); C5-C9 (infecções recorrentes por Neisseria); componentes clássicos iniciais C1, C2, C4 (doença semelhante ao LES e infecções por microrganismos encapsulados); DAF/CD55 e CD59 (HPN, hemólise mediada pelo complemento). - Anti-CD20/rituximabe e alguns anticorpos terapêuticos destroem células por citotoxicidade dependente do complemento. O eculizumabe (anti-C5) é usado na HPN e na síndrome hemolítico-urêmica atípica (aHUS), com risco de infecções por Neisseria (vacinar antes).

**Pérola para provas:** Se uma questão descrever um teste sorológico em que hemácias de carneiro são usadas como indicador e NÃO ocorre hemólise, pense em fixação do complemento = o paciente tem anticorpos contra o antígeno testado.